赵用贤(1535年5月21日～1596年4月12日），字汝师，号定宇，南直隶苏州府常熟县（今江苏省常熟市虞山街道）人，祖籍南直隶常州府江阴县（今江苏省江阴市）。广东参议赵承谦第三个儿子，宋朝宗室、简国公赵仲谈之后。明朝官员，藏书家。
隆庆五年（1571年），赵用贤在京会试。取中式举人邓以赞等四百人，赵用贤居第二十五名。赴内府殿试，赵用贤为三甲第二十八名。得诏赐同进士出身。明穆宗考选翰林院庶吉士，赵用贤作《平古田奏捷》，初拟名第四，明穆宗看到他的文章后把他列为第一名，令他进入翰林院读书。九月十七日（10月5日），嫡母萧氏卒，赵用贤回籍守制。
万历二年（1574年）十二月，守孝期满，在申时行的帮助下，赵用贤试授翰林院检讨。
万历四年（1576年）二月，分典会试。六月二十四日（7月19日），张居正建议重修《大明会典》，并列出编修名单，赵用贤充任纂修官。
万历五年（1577年），内阁首辅张居正的父亲死了，按照当时礼制，张居正应该离职，回家守丧。但当时皇帝年幼，朝廷命他夺情，不必放弃官职。赵用贤个性刚直、敢于仗义执言。他挺身而出，上疏纠劾张居正，他在奏疏中说：“臣窃怪居正能以君臣之义效忠于数年，不能以父子之情少尽于一日。……国家设台谏以司法纪、任纠绳，乃今哓哓为辅臣请留，背公议而徇私情，蔑至性而创异论。臣愚窃惧士气之日靡，国是之日淆也”，结果遭到廷杖处罚并削职。赵用贤长的比较胖，被廷杖后，溃烂的肉脱落下来，有巴掌大小。他叫妻子将这些脱下的肉制作成腊肉，并精心珍藏起来，用来警示子孙。
万历六年（1578年），赵用贤居家养伤，在书牍中屡次言及自己在被廷杖后的惨状，并屡次访问王世贞。
万历八年（1580年），赵用贤跟随王世贞游玩，拜昙阳子为师。
万历九年（1581年）九月，赵用贤会沈懋学于娄东，欢语数日而别。当时，赵用贤有个女儿许配给吴之彦的儿子吴镇。吴之彦害怕连累自己，赶紧结交张居正，得到巡抚福建之职。经过家门，不向赵用贤行礼，而且让吴镇坐在他弟弟的下面，说“是婢女之子”，以此激怒赵用贤。赵用贤很愤怒，已察觉他是受张居正的党徒王篆的指使，于是把礼金退还，回绝了这门亲事，吴之彦大喜。
万历十一年（1583年），明神宗下诏录用因建言而除去官籍的人，赵用贤被起用为旧职。明神宗命赵用贤参对《大明会典》校正事务。六月二日，大学士申时行等上疏，请从御史曹一鹏之荐。以吴中行、赵用贤二人遭挫已久，不宜仅从常调，于是明神宗擢升赵用贤为右春坊右赞善，仍兼任翰林院检讨。
万历十二年（1584年），四月初，因赵用贤性格刚直，恃才傲物，多次品评大臣的得失，与王道行称“续五子”，又与胡应麟等称“末五子”，申时行、许国等非常忌恨他。正好李植、江东之攻击申时行，许国竭力抨击李植、江东之，暗地里却责怪赵用贤、吴中行。于是赵用贤上疏辩白、请求离职。明神宗不准他离去，朋党之争从此开始。赵用贤再次乞求归乡养病，明神宗不允。明神宗命赵用贤赴河南册封郑府繁昌王。十月二十八日，明神宗擢升赵用贤为司经局洗马，管理国子监司业事务。
万历十三年（1585年），五月二十六日，明神宗命赵用贤以原官兼任翰林院修撰，和赵志皋等人纂修玉牒。八月二十二日，兵科给事中李弘道请求录用赵用贤。十月十八日，明神宗命赵用贤充任《大明会典》纂修官。
万历十四年（1586年）正月，赵用贤充任经筵讲席。二月，再分典会试。三月二十三日（5月11日），明神宗升赵用贤为右春坊右庶子兼翰林院侍读，掌管右春坊印信。九月十二日，明神宗命赵用贤担任武举考试官。
万历十五年（1587年），明神宗擢升赵用贤为南京国子监祭酒。二月十九日，《大明会典》重修告成，赵用贤升俸一级，并赐予诰命。三月十四日，明神宗赏赐赵用贤银币、宝钞。六月十一日，到任南京国子监。